Объем фиксирующей жидкости должен не менее чем
Перейти к содержимому

Объем фиксирующей жидкости должен не менее чем

  • автор:

Изготовление препарата до стекла с окрашиванием, без консультации патолога из операционного материала (до 6 блоков)

Во многих случаях изменения органов, обнаруженных при макроскопическом исследовании, настолько не значительны, что не позволяют врачу сделать выводов о характере патологического процесса или причине смерти. В связи с этим возникает необходимость в микроскопическом исследовании тканей. Все материалы изучаются в виде фиксированных и окрашенных срезов или гистологических препаратов.

  1. Сроки исполнения
  2. Показания и противопоказания
  3. Интерпретация и форма выдачи результата

Гистологическая кассета – одноразовая пластиковая прямоугольная емкость размером 4см х 2,7см х 0,6см с защелкивающейся крышкой, с отверстиями в корпусе и крышке, в которую на этапе вырезки помещают фрагмент биоматериала толщиной не более 0,4см. Она предназначена для гистологической проводки (фиксация, обезвоживание, уплотнение) и заливки образцов в парафин (изготовление блоков). Размер парафинового блока будет таким же, как и кассета или меньше. Тест AN508 предусматривает, что присланный биоматериал разложат только в 2 таких кассеты, а AN518 предусматривает 6 кассет.

Ткани и органы для гистологического изучения подвергаются предварительной сложной обработке, имеющей целью сделать объект пригодным для микроскопического исследования.

Основными этапами такой подготовки являются: фиксирование, обезвоживание и уплотнение (всё вместе называют «проводкой» биоматериала), заливка, изготовление срезов, окрашивание и заключение срезов. Для приготовления постоянного препарата необходимо перевести живую протоплазму гистоструктур в неизменное состояние для предотвращения её распада и гниения. Обычно для фиксации используется формалин в 10%-ном растворе. Для хорошей фиксации берут небольшой фрагмент биоматериала ~ 2,5см х 3см х 2см. Объём фиксирующей жидкости должен в 20-30 раз превышать объём фиксируемых образцов ткани. Фиксация обычно продолжается около суток и может длиться более продолжительное время в зависимости от характеристики структуры ткани. Быстрой фиксации способствует, главным образом, небольшая толщина фрагмента. Мелкие кусочки (эндобиоптаты и пункционные биопсии) фиксируются значительно быстрее и дают возможность изготовить препарат в более ранние сроки. После фиксации материал становится несколько плотнее, но ещё недостаточно для изготовления тонких срезов. Для обезвоживания и уплотнения образец ткани последовательно переносят в спирты восходящей концентрации, оставляя в каждом, от нескольких часов до суток. Исключение составляет жировая ткань, для которой необходимо более продолжительное время проводки – до трех суток В последнюю очередь биоматериал помещают в диализатор со 100 градусным спиртом. После обезвоживания плотность фрагмента увеличивается, но для получения тонких срезов его необходимо залить в парафин. Парафиновая заливка требует значительно меньше времени, чем любая другая и с ней получают более тонкие срезы. Парафиновые срезы, наклеенные на стёкла, удобно дальше обрабатывать и хранить, а парафиновые блоки могут храниться долгое время.

Для изготовления срезов используется специальный прибор — микротом системы Майнота для парафиновых блоков с неподвижным ножом. Парафиновые срезы сразу наклеиваются на предметные стёкла с полизиновым покрытием. Окраску срезов проводят специфически окрашивающими веществами. В качестве основного красителя (синяя краска) чаще всего используют гематоксилин, который окрашивает хроматин клеточных ядер, а из кислых красителей (красная краска) – эозин, окрашивающий всю протоплазму клетки. Обычно сначала срезы красят основным красителем, промывают, а затем окрашивают кислым красителем. Заключение срезов – последний этап изготовления постоянного гистологического препарата. В качестве среды для заключения применяются прозрачные застывающие среды, которые пропитывают срез, затвердевают, прижимая покровное стекло к предметному, и удерживают срез.

Сроки исполнения: 7 дней (плюс 1-2 дня для регионов).

Исследуемый аналит: биоптаты тканей и органов.

Показания: гистологическое исследование особенно ценно при изучении новообразований – оно позволяет определить их характер (доброкачественный или злокачественный), стадии процесса, скорость роста, результативность терапии. Также гистологические исследования широко используются в гастроэнтерологии, оториноларингологии, трансплантологии, дерматологии и других разделах ветеринарной медицины.

Противопоказания: общие противопоказания для седации (в случае невозможности проведения процедуры без ее применения). Ограничениями для проведения гистологического исследования могут стать нарушения свертываемости крови и аллергия на анестетики (эти факторы не позволят провести биопсию), тромбоцитопения, сердечная недостаточность.

Метод отбора: провести процедуру биопсии.

Преаналитика: биоптат поместить в контейнер (гистопот), заполненный соответствующим объемом забуференного 10% раствора формалина. Соотношение биоматериал: формалин должно быть не менее 1:10. Подписать контейнер – вид, кличка животного, фамилия владельца. Заполнить все графы направительного бланка с ОБЕИХ сторон! Температурный режим транспортировки в лабораторию +2℃. +8℃ (синий пакет). Не замораживать!

Форма выдачи результата: бланк с макроописанием присланного биоптата, готовые гистологические препараты – парафиновые блоки, стекла с окрашенными срезами.

Для организаций

Согласно приказа Минздрава России от 24 марта 2016 г. № 179н «О Правилах проведения патолого-анатомических исследований»:

  • Биопсийные (операционные) материалы, предназначенные для проведения прижизненных патолого-анатомических исследований непосредственно после забора подлежат консервации в 10%-ном растворе нейтрального формалина. Объем фиксирующей жидкости должен превышать объем погруженной в нее ткани в 10 раз.
  • Запрещается использовать для консервации биопсийного (операционного) материала иных жидкостей — таких как спирт этиловый 70%, спирт этиловый 95%, кислота уксусная 3%, перекись водорода 3%, натрий хлорид 0,9% и других.
  • Обращаем внимание, что после 72 часов хранения в формалине материал остается пригодным для гистологического исследования, но не пригоден для выполнения ИГХ и генетических исследований!
  • Категорически запрещается делить операционный или биопсийный материал на части и отправлять в разные патогистологические лаборатории, так как изменения, характерные для данного патологического процесса могут оказаться только в одной части объекта, что ведет к разным результатам исследования.

Маркировка материала (на флаконе) обязательно должна содержать следующие сведения:

1) краткое наименование медицинской организации
2) регистрационный номер направившей медицинской организации (из журнала регистрации биопсийного (операционного) материала, направляемого для прижизненного патолого-анатомического исследования
3) фамилия и инициалы пациента
4) номер флакона
5) количество тканевых фрагментов во флаконе

Биопсийный (операционный) материал направляется на исследование лечащим врачом или медицинским работником, осуществившим взятие биопсийного (операционного) материала, с приложением направления на прижизненное патолого-анатомическое исследование, выписки из медицинской документации пациента, содержащей результаты проведенных лабораторных, инструментальных и иных видов исследований, описания медицинских вмешательств (манипуляций, операций), диагноза заболевания (состояния) с указанием кода заболевания (состояния) в соответствии с Международной статистической классификацией болезней и проблем, связанных со здоровьем (далее — МКБ).

Материал присланный в лабораторию без направления в работу не принимается.

Необходимо указать данные по пациенту: возраст, пол, локализация поражения, клинический диагноз, клинические данные, проводимая специфическая терапия, протокол операции/биопсии. Для пересмотра гистологических стекол: маркировка препаратов присылаемых для исследования.

Необходимо указать дополнительные данные для нозологий:

Гинекологический материал:
– Дата последней менструации;
– Менопауза (лет);
– Длительность цикла/аменорея;
– Прием гормональных препаратов (название, дозировка, длительность приема);
– Основные жалобы пациентки, с которыми обратилась: дата, длительность и характер нарушений;
– Протокол гистероскопии.

Для материала ЖКТ:
– Для биопсий пищевода, желудка, кишечника ОБЯЗАТЕЛЕН протокол гастроскопии или колоноскопии;
– Для биопсий пищевода при подозрении на пищевод Баррета –расстояние от кардиоэзофагеального перехода до места биопсии;
– Для классификации гастрита по OLGA/OLGIM необходимо взять 5 биоптатов (2 антрум, 2 тело, 1 угол желудка);
– При опухолях панкреато-биллиарной зоны –данные КТ/МРТ поджелудочной железы и желчных протоков;
– Полипы толстой кишки должны быть маркированы с обязательным указанием локализации и на каком расстоянии взято;
– При подозрении на ВЗК (язвенный колит, болезнь Крона) – указание клинической картины (эндоскопическая картина, возраст больного, продолжительность заболевания, методы лечения). Необходимо предоставлять не менее 5 биоптатов из каждого отдела кишки (обязательно включение подвздошной и прямой кишки).

Для материала из печени (биоптаты и операционный материал):
– Показатели уровня АФП в крови;
– Данные КТ, МРТ, УЗИ.
Для молочных желез:
– Данные предыдущих гистологических исследований (если проводились);
– Данные маммографического обследования;
– РГ + описание (для операционного материала).

Для материалов костной ткани, ЦНС:
– РГ/КТ/МРТ, снимки поражения, ОБЯЗАТЕЛЬНО описание рентгенолога с предварительным диагнозом.

Для кожных биоптатов:
– Точная локализация;
– При воспалительных заболеваниях: осмотр врача-дерматолога и его дифференциальный диагноз;
– Динамика развития образования и анамнез.

Желательно указать телефон лечащего врача, для обсуждения клинической ситуации пациента, при необходимости.

По окончании проведения прижизненного патолого-анатомического исследования врач-патологоанатом заполняет протокол исследования, включающие формулировку заключения, комментарии к заключению и рекомендации при их наличии.

Оригинал Протокола направляется в медицинскую организацию, направившую биопсийный (операционный) материал на прижизненное патолого-анатомическое исследование, второй экземпляр Протокола хранится в архиве патолого-анатомического бюро (отделения, учреждения).

Копия Протокола, а также биологический материал в стеклах и блоках также может быть выдана по письменному заявлению пациенту либо его законному представителю в соответствии с частью 5 статьи 22 Федерального закона от 21 ноября 2011 г. № 323-ФЗ «Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации» (Собрание законодательства Российской Федерации, 2011, № 48, ст. 6724; 2013, № 48, ст. 6165).

2. Цитологический материал:

Материал, предоставляемый в лабораторию (стекла с мазком, пробирка с пунктатом) должен быть маркирован внутренним номером клиники, дополнительно может быть указана фамилия пациента. Номер на стекле (пробирке) должен совпадать с номером в сопроводительном документе (направлении).

Материал присланный без направления в работу не принимается.

В направлении должно быть указаны: внутренний номер клиники совпадающий с номером на стекле (пробирке), возраст пациента, клинический диагноз, локализация поражения, клинические данные.

Правила работы с цитологическим материалом (пункционный забор):

1. Мазки должны быть приготовлены на чистых предметных стеклах
2. Для распределения субстрата по стеклу необходимо спредер (возможно использование второго предметного стекла)
3. Капля субстрата наносится в самый центр стекла на расстояние около 1 см от края
4. Спредер распологается напротив капли под углом 30 градусов и капля быстро распределяется по линии соприкосновения стекол. Нельзя отрывать спредер от стекла до полного распределения субстрата.
5. Мазки должны быть высушены на воздухе, при комнатной температуре, время высыхания зависит от толщины мазка
6. Полностью высушенный мазок отправить в лабораторию, стекла не должны соприкасаться нанесенными поверхностями между собой
7. Мазки не окрашивать

Требования к предоставляемому материалу

Требования к предоставляемому материалу (для организаций):

Согласно приказа Минздрава России от 24 марта 2016 г. № 179н «О Правилах проведения патолого-анатомических исследований»:

  • Биопсийные (операционные) материалы, предназначенные для проведения прижизненных патолого-анатомических исследований непосредственно после забора подлежат консервации в 10%-ном растворе нейтрального формалина. Объем фиксирующей жидкости должен превышать объем погруженной в нее ткани в 10 раз.
  • Запрещается использовать для консервации биопсийного (операционного) материала иных жидкостей — таких как спирт этиловый 70%, спирт этиловый 95%, кислота уксусная 3%, перекись водорода 3%, натрий хлорид 0,9% и других.
  • Обращаем внимание, что после 72 часов хранения в формалине материал остается пригодным для гистологического исследования, но не пригоден для выполнения ИГХ и генетических исследований!
  • Категорически запрещается делить операционный или биопсийный материал на части и отправлять в разные патогистологические лаборатории, так как изменения, характерные для данного патологического процесса могут оказаться только в одной части объекта, что ведет к разным результатам исследования.

Маркировка материала (на флаконе) обязательно должна содержать следующие сведения:

1) краткое наименование медицинской организации
2) регистрационный номер направившей медицинской организации (из журнала регистрации биопсийного (операционного) материала, направляемого для прижизненного патолого-анатомического исследования
3) фамилия и инициалы пациента
4) номер флакона
5) количество тканевых фрагментов во флаконе

Биопсийный (операционный) материал направляется на исследование лечащим врачом или медицинским работником, осуществившим взятие биопсийного (операционного) материала, с приложением направления на прижизненное патолого-анатомическое исследование, выписки из медицинской документации пациента, содержащей результаты проведенных лабораторных, инструментальных и иных видов исследований, описания медицинских вмешательств (манипуляций, операций), диагноза заболевания (состояния) с указанием кода заболевания (состояния) в соответствии с Международной статистической классификацией болезней и проблем, связанных со здоровьем (далее — МКБ).

Материал присланный в лабораторию без направления в работу не принимается.

Необходимо указать данные по пациенту: возраст, пол, локализация поражения, клинический диагноз, клинические данные, проводимая специфическая терапия, протокол операции/биопсии. Для пересмотра гистологических стекол: маркировка препаратов присылаемых для исследования.

Необходимо указать дополнительные данные для нозологий:

Гинекологический материал:
– Дата последней менструации;
– Менопауза (лет);
– Длительность цикла/аменорея;
– Прием гормональных препаратов (название, дозировка, длительность приема);
– Основные жалобы пациентки, с которыми обратилась: дата, длительность и характер нарушений;
– Протокол гистероскопии.

Для материала ЖКТ:
– Для биопсий пищевода, желудка, кишечника ОБЯЗАТЕЛЕН протокол гастроскопии или колоноскопии;
– Для биопсий пищевода при подозрении на пищевод Баррета –расстояние от кардиоэзофагеального перехода до места биопсии;
– Для классификации гастрита по OLGA/OLGIM необходимо взять 5 биоптатов (2 антрум, 2 тело, 1 угол желудка);
– При опухолях панкреато-биллиарной зоны –данные КТ/МРТ поджелудочной железы и желчных протоков;
– Полипы толстой кишки должны быть маркированы с обязательным указанием локализации и на каком расстоянии взято;
– При подозрении на ВЗК (язвенный колит, болезнь Крона) – указание клинической картины (эндоскопическая картина, возраст больного, продолжительность заболевания, методы лечения). Необходимо предоставлять не менее 5 биоптатов из каждого отдела кишки (обязательно включение подвздошной и прямой кишки).

Для материала из печени (биоптаты и операционный материал):
– Показатели уровня АФП в крови;
– Данные КТ, МРТ, УЗИ.
Для молочных желез:
– Данные предыдущих гистологических исследований (если проводились);
– Данные маммографического обследования;
– РГ + описание (для операционного материала).

Для материалов костной ткани, ЦНС:
– РГ/КТ/МРТ, снимки поражения, ОБЯЗАТЕЛЬНО описание рентгенолога с предварительным диагнозом.

Для кожных биоптатов:
– Точная локализация;
– При воспалительных заболеваниях: осмотр врача-дерматолога и его дифференциальный диагноз;
– Динамика развития образования и анамнез.

Желательно указать телефон лечащего врача, для обсуждения клинической ситуации пациента, при необходимости.

По окончании проведения прижизненного патолого-анатомического исследования врач-патологоанатом заполняет протокол исследования, включающие формулировку заключения, комментарии к заключению и рекомендации при их наличии.

Оригинал Протокола направляется в медицинскую организацию, направившую биопсийный (операционный) материал на прижизненное патолого-анатомическое исследование, второй экземпляр Протокола хранится в архиве патолого-анатомического бюро (отделения, учреждения).

Копия Протокола, а также биологический материал в стеклах и блоках также может быть выдана по письменному заявлению пациенту либо его законному представителю в соответствии с частью 5 статьи 22 Федерального закона от 21 ноября 2011 г. № 323-ФЗ «Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации» (Собрание законодательства Российской Федерации, 2011, № 48, ст. 6724; 2013, № 48, ст. 6165).

Тесты онлайн

Тесты онлайн по различным предметам и дисциплинам. Большая подборка полезных тестов онлайн включающая экзамен охранника, мигранта, по охране труда, в ГИМС, по русскому языку, литературе, а также для получения лицензии на оружие, психологические тесты и тесты для проведения профессионального отбора (профотбора) поступающих на службу в силовые структуры — такие как вооруженные силы РФ, в том числе в военные училища (проводят военкоматы), органы внутренних дел (полицию), в том числе институты МВД РФ, министерство по чрезвычайным ситуациям (МЧС).

Тесты онлайн разработаны специально для повышения своего уровня знаний, и подходят для людей различных профессий, а также учащихся различных учебных заведений, как средних так и высших. Многие учащиеся школ, СПТУ, колледжей, институтов, академий воспользовались нашими тестами онлайн, для подготовки к успешной сдачи экзаменов. Грамотно и удобно разработанный интерфейс тестов позволяет отлично подготовится и успешно сдать экзамены.

Птичка синичка села на ветку, ветка упала птичка пропала.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *